400-133-6008
41次
2025-10-23
化妝品需長期接觸皮膚、黏膜（如口紅接觸口腔、眼影接觸眼周），若含致突變物質，可能通過皮膚滲透損傷人體細胞基因，甚至埋下遠期健康隱患。化妝品回復突變試驗能在產品上市前，快速篩查出這類風險，避免有害產品接觸消費者。
化妝品回復突變試驗方法
1.準備核心材料
試驗菌株：選用6株標準菌株（如鼠傷寒沙門氏菌TA1535、TA97、TA98、TA100、TA102，或搭配大腸桿菌WP2uvrA），均為“營養缺陷型突變株”（缺組氨酸/色氨酸合成能力，正常無營養培養基上難生長）。
受試樣品：化妝品需處理成可溶解/混懸的樣品液（如用生理鹽水、二甲基亞砜稀釋，避免溶劑自身致突變）。
關鍵試劑：含S9代謝激活系統（模擬人體肝臟代謝，檢測需經代謝才致突變的物質）和不含S9的兩種體系；以及“缺組氨酸/色氨酸的培養基”（僅反向突變菌能生長）。
2.設定試驗分組
為對比判斷結果，需同步設4組，每組做3個重復：
空白對照組（僅菌株+培養基，看“自發回復突變菌落數”）；
陽性對照組（菌株+已知致突變劑，驗證試驗體系有效）；
樣品組（菌株+不同濃度化妝品樣品）：分“加S9”和“不加S9”兩種情況，覆蓋“直接致突變”和“經代謝致突變”兩類物質。
3.接種與培養
取菌株菌液，分別與“樣品液（或對照液）”“S9混合液（或無S9緩沖液）”混合；
加入融化的“頂層瓊脂”（含微量組氨酸/色氨酸，供菌株初期少量生長），快速混勻后倒在“底層培養基”上；
37℃恒溫培養48-72小時，讓反向突變菌形成可見菌落。
4.觀察與計數
培養結束后，直接數每組平板上的“回復突變菌落數”，計算平均值——若樣品組菌落數顯著多于空白對照組，則提示化妝品可能有致突變性。
化妝品回復突變試驗注意事項
菌株質量把控：試驗前需驗證菌株特性，避免菌株退化或污染，否則會直接導致結果失真。
樣品處理規范：化妝品需制成可溶解/混懸的均勻液體，避免含顆粒、油脂等雜質；同時控制樣品濃度，過高可能抑制細菌生長（出現假陰性），過低則可能漏檢致突變性。
S9系統有效性驗證：S9代謝液需新鮮制備，且試驗前要通過“陽性對照”確認其活性，若S9失效，會漏檢“需代謝才致突變”的物質。
陰性/陽性對照必設：必須同步做空白對照組和陽性對照組，缺少對照則無法判斷結果是否可靠。
避免抑菌干擾：若樣品組菌落數過少，需先排查是否“抑制細菌生長”，而非直接判定“陰性”——抑菌會掩蓋致突變性，導致假陰性。
結果重復性驗證：可疑結果需重復試驗，且可調整劑量或試驗條件（如改變S9用量），避免單次試驗誤差影響結論。
培養條件穩定：培養溫度（37℃±1℃）、時間（48-72小時）需嚴格控制，溫度波動或培養不足/過久，會影響菌落形成數量，干擾計數。
檢驗檢測認證服務機構。
整體技術解決方案。
