400-133-6008
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2025-10-23
化妝品回復突變試驗原理是用“營養缺陷型細菌”（如鼠傷寒沙門氏菌）——這類細菌因基因缺陷無法合成生長必需的營養（如組氨酸），正常情況下難生長；若化妝品含致突變物質，會誘導細菌基因“反向突變”（缺陷基因恢復正常），使其能在缺營養的培養基上形成菌落，通過對比菌落數量判斷化妝品是否有誘導基因突變的風險。
化妝品回復突變試驗標準
化妝品回復突變試驗主要依據《化妝品安全技術規范（2015年版）》第六章8細菌回復突變試驗（2019年第12號）》進行，該試驗通常被稱為Ames試驗。
1）菌株選擇：采用鼠傷寒沙門氏菌TA1535、TA97或TA97a或TA1537、TA98、TA100、TA102或大腸桿菌WP2uvrA或大腸桿菌WP2uvrA〔pKM101〕作為標準組合菌株。
2）試驗條件：試驗應在有和沒有S9代謝激活系統的情況下同時進行。S9混合液是經多氯聯苯或苯巴比妥鈉和β-萘黃酮結合誘導的大鼠肝勻漿，在9000g下離心10min后的肝勻漿上清液，用于模擬體內代謝環境。
3）培養基制備：根據不同菌株需求，制備含有微量組氨酸或色氨酸的頂層瓊脂培養基等，以滿足細菌在最初幾個小時內的生長需求，當添加的組氨酸/色氨酸用盡時，只有突變菌才能繼續生長成可見的反向突變菌落。
化妝品回復突變試驗結果判定
1.回復菌落計數：
直接計算培養基上的回復菌落數，計算每個菌株每劑量三個平板上回復菌落數的平均值和標準差。
2.結果評價：
在良好的背景生長條件下，試驗菌株TA1535、TA1537、TA98和大腸桿菌的回復菌落數等于或大于未處理對照組的2倍，其他試驗菌株回復菌落數等于或大于未處理對照組的2倍，有下列情況之一可判定為陽性結果：
（1）存在劑量反應關系；
（2）一個測試點具有可重復的陽性結果。陰性結果表明受試物質在試驗條件下未對試驗菌株誘導基因突變。
3.點試法結果評價：
如果供試物樣紙周圍有較多密集的回復菌落，與未處理的對照有顯著差異，可初步判定供試物突變試驗陽性，但應通過摻入驗證試驗。
4.驗證：
明顯的陽性結果無需驗證；可疑結果應通過其他方法驗證；陰性結果需驗證，即重復試驗，可改變試驗條件，如劑量間隔等。
化妝品回復突變試驗應用場景
新原料備案/注冊：評估新原料的遺傳毒性風險，是化妝品原料安全性評估的核心環節；
終產品安全性驗證：針對宣稱“功效性”（如美白、抗衰）或含高風險成分（如某些植物提取物、防腐劑）的化妝品，驗證其是否存在致突變隱患；
生產工藝優化：若某原料試驗陽性，可通過調整提取工藝、添加抑制劑等方式降低致突變性，再重新檢測。
檢驗檢測認證服務機構。
整體技術解決方案。
