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2025-10-24
化妝品的常規毒理學試驗（如皮膚刺激性、急性毒性試驗）主要評估對器官或組織的直接損傷，而體外哺乳動物細胞基因突變試驗專門針對遺傳物質（DNA）的損傷。它能發現其他試驗無法檢測的、可能導致基因層面改變的潛在風險，是評估化妝品“遺傳安全性”的核心環節。
化妝品體外哺乳動物細胞基因突變試驗方法
1、細胞株選擇
首選中國倉鼠卵巢細胞（CHO細胞）的HGPRT或TK位點，以及小鼠淋巴瘤細胞（L5178Y細胞）的TK位點。
這些細胞株的特定基因（如TK）發生突變后，會獲得對某種特定藥物（如三氟胸苷，TFT）的抗性，從而能夠在含有該藥物的培養基中存活并形成菌落。
2、試驗設計
分組：試驗通常設置至少4個組，包括空白對照組（無受試物）、溶劑對照組（僅含溶解受試物的溶劑）、陽性對照組（已知的致突變物）和受試物組（不同濃度的待測試化妝品成分）。
濃度設置：受試物組需設置多個濃度梯度，最高濃度通常以產生明顯細胞毒性（如抑制細胞生長率50%-80%）為限，同時需包含一個無細胞毒性的濃度。
3、處理與培養
將處于對數生長期的細胞與不同濃度的受試物在適宜條件下（如37℃、5%CO?）接觸一定時間（通常為3-6小時）。
接觸結束后，去除受試物，將細胞在新鮮培養基中繼續培養一段時間（表達期），以讓基因突變得到充分表達。
4、突變頻率測定
將經歷表達期的細胞接種到含有選擇性藥物（如TFT）的培養基中，同時接種一部分細胞到不含選擇性藥物的培養基中以計算克隆形成率。
在適宜條件下培養一段時間后，計數在選擇性培養基上形成的突變菌落數，并結合克隆形成率計算出特定基因位點的突變頻率。
化妝品體外哺乳動物細胞基因突變試驗意義
1）評估遺傳毒性風險
基因突變是導致癌癥發生的重要早期事件之一。通過該試驗，可以快速、高效地篩選出化妝品中可能引起細胞基因突變的成分，從而評估其潛在的致癌風險和遺傳危害。
2）減少動物試驗依賴
作為一種體外試驗方法，它可以在細胞水平上模擬體內的基因突變過程，相比傳統的動物試驗，具有周期短、成本低、通量高的優點，同時也符合國際上“減少、替代、優化”（3R原則）動物試驗的發展趨勢。
3）指導產品配方安全設計
試驗結果可以為化妝品研發企業提供重要的科學依據，幫助其篩選安全的原料，優化產品配方，避免使用具有潛在致突變性的成分，從源頭保障化妝品的安全性。
4）滿足法規監管要求
許多國家和地區的化妝品法規（如中國的《化妝品安全技術規范》）都將體外哺乳動物細胞基因突變試驗作為評估化妝品原料及產品遺傳毒性的關鍵試驗之一，是產品上市前安全性評估的重要組成部分。
檢驗檢測認證服務機構。
整體技術解決方案。
