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　　目前國內(nèi)食具消毒柜脊髓灰質(zhì)炎病毒滅活試驗(yàn)主要參照GB17988-2008《食具消毒柜安全和衛(wèi)生要求》這一強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)對(duì)食具消毒柜的消毒效果進(jìn)行星級(jí)劃分，其中二星級(jí)消毒柜要求對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒等具有代表性的菌種具備良好的滅活能力。

　　食具消毒柜脊髓灰質(zhì)炎病毒滅活試驗(yàn)方法

　　1)試驗(yàn)毒株選擇：

　　通常選用脊髓灰質(zhì)炎病毒I型疫苗株作為試驗(yàn)毒株。

　　2)病毒懸液制備：

　　在專業(yè)的病毒實(shí)驗(yàn)室中，將脊髓灰質(zhì)炎病毒I型疫苗株接種于適宜的細(xì)胞培養(yǎng)基，如猴腎細(xì)胞（Vero細(xì)胞）或人胚肺二倍體細(xì)胞（2BS細(xì)胞）。在37℃、5%二氧化碳的培養(yǎng)箱環(huán)境下，培養(yǎng)3-5天，待細(xì)胞出現(xiàn)明顯的病毒感染病變效應(yīng)（如細(xì)胞變圓、脫落等），收獲含有病毒的細(xì)胞培養(yǎng)液。

　　通過低速離心去除細(xì)胞碎片，獲取澄清的病毒懸液。運(yùn)用微量中和試驗(yàn)或酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）等方法，精確測(cè)定病毒懸液的滴度，將其調(diào)整至1×10?-1×10?TCID??/mL（半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量），以保證試驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

　　3)樣品準(zhǔn)備：

　　選取食具消毒柜的內(nèi)膽、擱架、餐具模擬負(fù)載等作為試驗(yàn)樣品。對(duì)于整體宣稱具備消毒功能的消毒柜，可將整機(jī)作為測(cè)試對(duì)象。對(duì)樣品進(jìn)行嚴(yán)格的無菌預(yù)處理，先用75%乙醇擦拭表面，再放入無菌環(huán)境（如超凈工作臺(tái)）中風(fēng)干，避免樣品表面原有微生物對(duì)試驗(yàn)結(jié)果造成干擾。

　　準(zhǔn)備一定數(shù)量的無菌玻璃片或陶瓷片，將定量的病毒懸液均勻滴染在其表面，作為病毒污染載體，用于模擬實(shí)際使用中餐具被病毒污染的情況。

　　4)開展滅活試驗(yàn)：

　　將帶有病毒污染載體的樣品放入食具消毒柜內(nèi)，按照消毒柜產(chǎn)品說明書規(guī)定的正常消毒程序運(yùn)行，包括消毒時(shí)間、溫度（若為高溫消毒方式）、臭氧濃度（若為臭氧消毒方式）等參數(shù)設(shè)置。

　　若為組合式消毒方式（如紫外線+臭氧、高溫+臭氧等），需確保各消毒因子協(xié)同作用的條件符合產(chǎn)品設(shè)計(jì)要求。同時(shí)，設(shè)置未經(jīng)過消毒柜處理但帶有相同病毒污染載體的對(duì)照組樣品，放置在與試驗(yàn)組相同的環(huán)境條件下，僅不進(jìn)行消毒操作，用于對(duì)比病毒滅活前后的存活情況。

　　5)病毒回收與檢測(cè)：

　　待消毒柜完成消毒程序后，在無菌條件下取出試驗(yàn)組樣品上的病毒污染載體。使用無菌洗脫液（如含有2%胎牛血清的磷酸鹽緩沖液）將載體表面殘留的病毒洗脫下來，通過反復(fù)吹打、振蕩等操作，確保病毒充分洗脫。

　　采用細(xì)胞培養(yǎng)法對(duì)洗脫液中的病毒進(jìn)行檢測(cè)，將洗脫液接種到長滿單層敏感細(xì)胞（如上述Vero細(xì)胞或2BS細(xì)胞）的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，在適宜條件下培養(yǎng)7-10天，每天觀察細(xì)胞病變情況。依據(jù)細(xì)胞病變效應(yīng)，計(jì)算病毒的滅活對(duì)數(shù)值。

　　同時(shí)，對(duì)對(duì)照組樣品上的病毒進(jìn)行同樣的回收與檢測(cè)操作，作為計(jì)算滅活對(duì)數(shù)值的參照。

　　6）結(jié)果判定：

　　根據(jù)GB17988-2008標(biāo)準(zhǔn)，二星級(jí)食具消毒柜對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒的滅活對(duì)數(shù)值應(yīng)≥4.00。即經(jīng)過消毒柜消毒處理后，試驗(yàn)組樣品上脊髓灰質(zhì)炎病毒的滴度相較于對(duì)照組降低的對(duì)數(shù)值需達(dá)到4.00及以上，才判定該消毒柜對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒的滅活性能符合二星級(jí)標(biāo)準(zhǔn)要求。

　　若滅活對(duì)數(shù)值低于4.00，則表明消毒柜的消毒效果未達(dá)標(biāo)，可能需要對(duì)消毒柜的消毒原理、結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)、運(yùn)行參數(shù)等方面進(jìn)行優(yōu)化改進(jìn)，以提升其對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒及其他潛在致病病毒的消殺能力。