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2025-06-24
抑菌劑是一類能夠抑制或殺滅微生物生長的化學或天然物質,常用于阻止細菌、真菌等病原體繁殖,降低感染風險。與殺菌劑不同,它主要通過干擾微生物代謝或破壞細胞結構實現抑菌效果,但不保證完全滅菌,常見于日常用品、藥品及醫療器械中。抑菌劑抑菌性能試驗有哪些方法及步驟?
抑菌劑抑菌性能試驗方法步驟分析
(1)抑菌圈法(擴散法)
適用于定性或半定量評估抑菌劑的擴散性能,常用方法包括:
?樣品制備?:
固體/半固體樣品:裁剪成直徑約5-6mm的圓片(如濾紙片、金屬片、布料),或打孔后填充樣品粉末。
液體樣品:浸漬濾紙片或直接加入牛津杯/孔洞中。
?接種細菌?:將測試菌懸液(濃度約1×10?CFU/mL)均勻涂布于瓊脂平板表面。
?放置樣品?:
紙片法:貼附含樣品的濾紙片于平板表面。
牛津杯法:放置滅菌牛津杯,注入待測樣品。
打孔法:在平板上打孔,移除瓊脂塊后加入樣品溶液或固體。
?培養與觀測?:37℃培養24小時,測量抑菌圈直徑(抑菌圈直徑=外徑-樣品直徑)。
(2)稀釋法(定量測定MIC)
用于測定最低抑菌濃度(MIC),步驟如下:
?樣品稀釋?:制備抑菌劑系列濃度梯度(如256μg/mL至0.25μg/mL),采用二倍稀釋法。
?菌液制備?:將測試菌培養至對數生長期,用緩沖液稀釋至約1×10?CFU/mL。
?混合與培養?:將菌液與不同濃度抑菌劑混合,接種于96孔板或試管中。37℃培養16-24小時。
?結果判定?:肉眼觀察無細菌生長的最低濃度為MIC。
(3)活菌計數法(定量評估抑菌率)
通過比較活菌數量變化定量評價抑菌效果:
?共培養?:將抑菌劑與菌液混合,培養一定時間(如24小時)。
?涂布計數?:取混合液稀釋后涂布瓊脂平板,培養后統計菌落數(CFU)。
?計算抑菌率?:抑菌率=[(對照組CFU-處理組CFU)/對照組CFU]×100%。
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