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紙巾菌落總數檢測方法及標準要求
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  • 2025-06-12

  細菌菌落總數超標,意味著紙巾可能攜帶大量細菌,這些細菌在與人體接觸,尤其是擦拭口鼻、眼睛等黏膜部位時,極易引發多種健康問題,如皮膚炎癥、腸道感染、呼吸道感染等。紙巾菌落總數檢測有哪些方法及標準要求?


紙巾菌落總數檢測


  紙巾菌落總數檢測方法


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  1、樣品剪碎與稀釋:


  用無菌剪刀將抽取的紙巾樣品剪成約1cm×1cm大小的碎片,準確稱取1g剪碎后的紙巾樣品,放入裝有99mL無菌稀釋液的三角瓶中。


  將三角瓶置于振蕩器上,以適當轉速振蕩10-15分鐘,使紙巾碎片上的細菌充分分散到稀釋液中,形成均勻的菌懸液。此過程如同將藏在紙巾纖維里的細菌“釋放”到溶液中,便于后續檢測計數。


  3、梯度稀釋:


  4、為了得到合適的菌落計數范圍,需對上述菌懸液進行梯度稀釋。用無菌吸管吸取1mL初始菌懸液,注入裝有9mL無菌稀釋液的試管中,充分混勻,此為10-1稀釋度。


  5、然后換用一支無菌吸管,從此試管中吸取1mL溶液,注入另一裝有9mL無菌稀釋液的試管中,再次混勻,得到10-2稀釋度的菌懸液。依此類推,根據預估的細菌含量,制備多個不同稀釋度的菌懸液,如10-3、10-4等。


  (二)平板接種與培養


  1、傾注平板:


  分別吸取0.1mL不同稀釋度的菌懸液,注入無菌培養皿中。每個稀釋度重復做3個平行培養皿,以提高檢測結果的準確性。然后將冷卻至50℃左右(溫度過高會燙死細菌,過低則培養基易凝固)的營養瓊脂培養基倒入培養皿中,每皿約15-20mL,迅速輕輕搖勻,使菌懸液與培養基充分混合均勻。


  待培養基凝固后,將培養皿倒置放入恒溫培養箱中培養。倒置培養皿可防止冷凝水滴落在培養基表面,影響菌落生長和計數。


  2、培養條件:


  將接種后的培養皿在36℃±1℃的恒溫培養箱中培養48小時±2小時。此溫度和時間條件是經過大量實驗驗證的,能滿足大多數細菌的生長需求,使細菌充分繁殖形成可見菌落,便于后續計數。


 ?。ㄈ┚溆嫈蹬c結果判定


  菌落計數:培養結束后,取出培養皿,在明亮的環境下,用肉眼觀察并計數每個培養皿中的菌落數量。選擇菌落數在30-300CFU之間的培養皿進行計數,這個范圍內的菌落數既能保證計數的準確性,又符合統計學要求。


  若所有稀釋度的培養皿菌落數均小于30CFU,則以最低稀釋度的菌落數乘以稀釋倍數報告結果;若所有稀釋度的培養皿菌落數均大于300CFU,則以最高稀釋度的菌落數乘以稀釋倍數報告結果;若所有稀釋度的培養皿菌落數均不在30-300CFU之間,應重新檢測。


  紙巾菌落總數檢測標準要求


  在GB/T20808-2022《紙巾》標準中,對紙巾的細菌菌落總數有著嚴苛規定,每克紙巾中細菌菌落總數不得超過200CFU(CFU即菌落形成單位)。這一數值意義重大,是衡量紙巾衛生狀況的關鍵指標。