過(guò)氧化物酶檢測(cè)

過(guò)氧化物酶是一種氧化還原酶，廣泛分布于自然界中，具有催化過(guò)氧化物的活性。中科檢測(cè)能提供專業(yè)的過(guò)氧化物酶檢測(cè)服務(wù)。

我們的服務(wù) 制藥醫(yī)療 過(guò)氧化物酶檢測(cè)

過(guò)氧化物酶檢測(cè)介紹

過(guò)氧化物酶是一種氧化還原酶，廣泛分布于自然界中，具有催化過(guò)氧化物的活性。它們能夠?qū)⒌孜锏难趸€原反應(yīng)催化至具有特定的中間體，從而延長(zhǎng)底物的存活期及改善其物理性質(zhì)。

過(guò)氧化物酶的輔基為血紅素，以H2O2為電子受體催化底物氧化的酶，它催化H2O2直接氧化酚類或胺類化合物，具有消除過(guò)氧化氫和酚類胺類毒性的雙重作用。在細(xì)胞內(nèi)，過(guò)氧化物酶主要分布在乳汁、白細(xì)胞、血小板等體液或細(xì)胞中，它們?cè)谏矬w的先天免疫防疫、植物微生物抗氧化應(yīng)激、真菌木質(zhì)素降解、植物細(xì)胞壁代謝及傷口愈合等重要生命過(guò)程中發(fā)揮作用。

中科檢測(cè)是專業(yè)的醫(yī)藥制劑檢測(cè)機(jī)構(gòu)，可開(kāi)展過(guò)氧化物酶檢測(cè)服務(wù)。

過(guò)氧化物酶檢測(cè)范圍

過(guò)氧化物酶按照所催化的底物分類，可以分為多種類型，最常見(jiàn)的是氫過(guò)氧化物酶和過(guò)氧化氫酶。

除了這兩種常見(jiàn)類型之外，還有一些其他類型的過(guò)氧化物酶。比如，過(guò)氧化物酸酯酶催化過(guò)氧化丙酮酸的分解，產(chǎn)生丙酮酸和二氧化碳;過(guò)氧化酰胺酶催化過(guò)氧化酰胺的分解，產(chǎn)生氨和乙酰胺等各種類型的過(guò)氧化物酶在分子結(jié)構(gòu)和催化機(jī)理上都有所不同。

過(guò)氧化物酶檢測(cè)方法

1.分光度法

最常用的比色法系采用鄰-聯(lián)(二)茴香胺作為氫的供體(DH2)，然后，于460nm處跟蹤所生成的氧化型染料色度。一個(gè)單位的過(guò)氧物酶即定為每分鐘分解1微克分子的過(guò)氧化物所需的酶量在過(guò)氧物酶比色分析中，曾試用了各種不同的染料。若測(cè)定谷物與面粉中的過(guò)氧物酶，采用還原性的2,6-二氯靛酚作氫供體，當(dāng)有過(guò)氧化物存在，即會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)顏色。測(cè)定牛奶中的過(guò)氧物酶時(shí)，曾使用了鄰-甲氧基苯酚，聯(lián)苯胺和其它可氧化性的底物，如維生素C、尿酸、細(xì)胞色素c和丁子香酚等。

2.電化學(xué)法

測(cè)定過(guò)氧化氫酶的電位法，亦可應(yīng)用來(lái)測(cè)定過(guò)氧物酶的活性。將二個(gè)鉑電極浸在過(guò)氧化物溶液中，當(dāng)電極上輸入2微安的微電流時(shí)，則由此呈現(xiàn)出一個(gè)平穩(wěn)的0.40伏的起始電壓。當(dāng)加入過(guò)氧物酶時(shí)，電壓即增加，直至達(dá)到從水釋放出氧所產(chǎn)生的電壓為止。在0.01~1.0單位/毫升的酶活性范圍內(nèi)，此曲線的斜率(電壓差值/時(shí)間差值)與過(guò)氧物酶的濃度成正比。由于過(guò)氧物酶需要有氫供體以利酶的催化功能的發(fā)揮，所以選擇的供體無(wú)論是氧化型還是還原型，它們?cè)谒玫碾妷合戮鶠椴痪哂须娀钚缘幕衔?如連苯三酚)。

3.熒光法

用熒光法測(cè)定過(guò)氧物酶的活性時(shí)，選用了高香草酸(HVA)作為指示劑。無(wú)熒光的高香草酸能被氧化成有強(qiáng)烈熒光的二聚物，其激發(fā)波長(zhǎng)為315nm，發(fā)射波長(zhǎng)為 425nm。在過(guò)氧物酶濃度為每毫升10-3~2單位范圍內(nèi)，生成熒光產(chǎn)物的速度與該酶的活性成正比。