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新聞資訊 技術文章 陰道加德納菌殺滅試驗懸液定量法操作步驟
陰道加德納菌殺滅試驗懸液定量法操作步驟
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  • 2025-10-30

　　陰道加德納菌殺滅效果試驗的核心目的，是科學評估特定物質（如消毒劑、抗菌藥物）對陰道加德納菌的殺滅能力，為相關產品研發、臨床用藥或衛生防控提供量化依據。陰道加德納菌殺滅試驗的懸液定量法，是通過將菌與待測試劑在液體中混合反應，再計數活菌來判斷殺滅效果的標準化方法，核心是用“定量數據”評估殺滅能力，而非定性判斷。


陰道加德納菌殺滅試驗


　　陰道加德納菌殺滅試驗操作步驟


　　陰道加德納菌殺滅試驗中，懸液定量法的核心是通過制備菌懸液、藥物作用、活菌計數，計算殺滅率，關鍵在于嚴格控制菌量、藥物濃度和作用時間，避免污染。


　　1、試驗準備


　　菌種復蘇：取陰道加德納菌標準菌株（如ATCC14018），接種于含5%馬血的哥倫比亞瓊脂平板，35-37℃厭氧培養48小時。


　　菌懸液制備：挑取單個菌落，用0.03mol/L磷酸鹽緩沖液（PBS，pH7.2）制成濃度為1×10?-5×10?CFU/mL的菌懸液，通過比濁法或平板計數校準濃度。


　　藥物稀釋：將待測試劑（如消毒劑、抗菌藥物）用PBS稀釋至所需濃度，確保稀釋后藥物濃度符合試驗目的（如最低殺菌濃度測試、殺滅效果驗證）。


　　2、殺滅作用試驗


　　反應體系建立：取1mL菌懸液加入9mL待測試劑中，迅速混勻，此時菌懸液最終濃度為1×10?-5×10?CFU/mL，藥物濃度為目標濃度。


　　作用時間控制：將反應體系置于35-37℃恒溫環境，按預設時間（如1min、5min、10min）計時，每個時間點設3個平行樣。


　　終止反應：到達預設時間后，立即取0.5mL反應液加入4.5mL中和劑（如含0.5%硫代硫酸鈉的PBS，需提前驗證中和劑有效性），混勻以終止藥物作用。


　　3、活菌計數與結果計算


　　梯度稀釋：將終止反應后的溶液進行10倍系列稀釋，選擇合適稀釋度（預計菌落數30-300CFU/平板）。


　　平板接種：取每個稀釋度的溶液0.1mL，均勻涂布于含5%馬血的哥倫比亞瓊脂平板，每個稀釋度設2個重復平板。


　　培養與計數：35-37℃厭氧培養48小時后，統計平板上的菌落數，計算每毫升溶液中的活菌數（CFU/mL）。


　　殺滅率計算：殺滅率（%）=（1-作用后活菌數/作用前活菌數）×100%，殺滅率≥99.9%通常判定為有效殺滅。